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乙醇、二甲苯等均为分析纯由成都科龙化工试剂厂提供
发表日期:2019-11-09 12:35| 来源 :本站原创 | 点击数:
本文摘要:鲜、干鱼腥草的药效学实验比较研究(一) 【摘要】 目的比较鲜、干鱼腥草的药理活性。方法通过体外抑菌法实验, 考察鲜、干鱼腥草的抑菌作用;二甲苯致小鼠耳炎症实验,观察鲜、干鱼腥草 的抗炎作用; 采用浓氨水诱导法引起的咳嗽实验,观察鲜、干鱼腥草的止咳

  鲜、干鱼腥草的药效学实验比较研究(一) 【摘要】 目的比较鲜、干鱼腥草的药理活性。方法通过体外抑菌法实验, 考察鲜、干鱼腥草的抑菌作用;二甲苯致小鼠耳炎症实验,观察鲜、干鱼腥草 的抗炎作用; 采用浓氨水诱导法引起的咳嗽实验,观察鲜、干鱼腥草的止咳作 用。结果鱼腥草鲜、干药材的水提取物的大小剂量组和醇提物的大剂量组均有 较好的抑菌、抗炎和止咳的作用,其中鲜品水提物大剂量组药效作用最优。结 论 鱼腥草鲜品抑菌、抗炎和止咳药理活性优于干品,水提物药理活性优于醇提 物。 【关键词】 鱼腥草 鲜品 干品 药效活性 Abstract:ObjectiveTo compare the pharmacological effect of fresh and dry Houttuynia cordata Thunb.. MethodsExperiment of bacteriostasis in vitro was carried out to observe the effect of fresh and dry extracts of Houttuynia cordata on the active of bacteriostasis. Experiment of inflammation caused by dimethyl benzene on the ear of mice was carried out to observe the effect on inflammation. Experiment of cough induced by strong aqua was carried out to observe the effect of stopping cough. ResultsWater and ethanol extracts of fresh/dry Houttuynia cordata had good bacteriostasis, stopping cough and anti-inflammation pharmacological action. Water extract of fresh Houttuynia cordata had better pharmacological action. ConclusionThe fresh extract of Houttuynia cordata has better pharmacological activity than that of dry one. While the water extract has better pharmacological activity than ethanol extract. Key words:Houttuynia cordata; Fresh herb; Dry herb; Pharmacological activity 鱼腥草为三白草科 (Saururaceae) 蕺菜属植物蕺菜 Houttuynia cordata Thunb.的干燥地上部分和新鲜全草,具有清热解毒、利尿通淋、祛痰止咳、镇 痛等功效〔1〕。现代研究表明鱼腥草含有挥发油、黄酮类、酚类、生物碱、多 糖等成分〔2,3〕,课题组对干、鲜鱼腥草进行 GC-MS,HPLC-MS 指纹图谱的系 列化学研究〔4,5〕,研究结果发现鱼腥草干鲜品的 GC-MS,HPLC-MS 指纹图谱 有一定的相识性,但峰的强度及化学成分的含量有一定的差别,因此对干、鲜 鱼腥草的药理活性进行对比研究,为鱼腥草活性成分的研究及鲜鱼腥草的开发 奠定一定的理论基础。 1 仪器与材料 1.1 动物昆明种健康小鼠,雌雄皆用,体重 18~22 g,由四川省实验动物 专委会养殖场提供。 1.2 菌种金黄色葡萄球菌(Atcc 25923)、大肠杆菌(O111 B4),由四川 省卫生干部进修学院提供。 1.3 药材与试剂 鱼腥草与 2005 年采自四川峨嵋山,经陈幼竹博士鉴定为三白草科蕺菜属植 物蕺菜 Houttuynia cordata Thunb.。鱼腥草分为两批,一批鲜药直接提取; 另一部分室温晾干作为干品药材。 乙醇、二甲苯等均为分析纯由成都科龙化工试剂厂提供,水为蒸馏水。 1.4 仪器 CM-1 超声雾化治疗仪,合力医疗器械厂,中国上海;电子天平(BS 210S,made by startoriu) 。 2 方法与结果 2.1 供试品溶液的制备精密称取鱼腥草鲜、干药材各 500 g,分别加水适 量煎煮两次,每次 2 h,过滤,合并两次滤液,浓缩至 2 g/ml(每毫升含 2 g 生药),得鱼腥草鲜、干药材的水提物,灭菌后冰箱保存备用。 精密称取鱼腥草鲜、干药材各 500 g,分别加适量 95%乙醇,回流提取 2 次,每次 2 h,过滤,合并两次滤液,浓缩至 2 g/ml(每毫升含 2 g 生药), 得鱼腥草鲜、干药材的醇提物,灭菌后冰箱保存备用。 2.2 体外抑菌作用考察〔6,7〕将致病菌金黄色葡萄球菌和大肠杆菌接种 于普通培养基中,按以下两种方法观察抑菌作用。 2.2.1 稀释法将菌种活化,挑取典型菌落接种于肉汤管中,置 37℃温箱中 24 h,作活菌计数并稀释成 1×106CFU/ml 待用。将营养琼脂加热溶化,冷至 50℃左右,加入药物做成含不同浓度药物(1/2.5~1/320)的营养琼脂,混 匀,倾注于平皿作成平板,将上述菌液分别接种药物琼脂平板,置 37℃,24 h,观察结果。结果见表 1。 由表 1 可知,鱼腥草鲜品水提物、干品水提物、鲜品醇提物和干品醇提物 对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为 12.5,100,25,100 mg/ml;对大肠 杆菌的最低抑菌浓度分别为 12.5,400,50,800 mg/ml。 2.2.2 打孔法用吸管吸取 1×106 CFU/ml 菌液 0.1 ml 于营养琼脂平板中, 用打孔器打孔,除去孔内琼脂,加入 1 g/ml 浓度的鱼腥草鲜、干药材醇提物和 水提物的药液 0.1 ml 于孔内,37℃培养 24 h,用米尺量取抑菌圈直径。结果 见表 2。表 1 鱼腥草鲜、干药材醇提物和水提物的抑菌作用(略)表 2 鱼腥草 鲜、干药材醇提物和水提物的抑菌作用(略) 由表 2 可知,鲜品水提物、干品水提物和鲜品醇提物对金黄色葡萄球菌均 具有较强的抑制作用,尤其是鲜品水提物。鲜品水提物和鲜品醇提物对大肠杆 菌亦有抑制作用。而干品醇提物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均未发现抑制作 用,有待进一步研究。 2.3 抗炎作用的考察〔8〕取雄性小鼠 99 只,随机分为 9 组,每组 11 只。 每日灌胃给药 1 次(0.2 ml/10 g 小鼠重量),连续 6 d,于末次给药 1 h 后, 用鼠耳肿胀法观察抗炎作用。分别于各组小鼠左耳前后涂二甲苯 0.05 ml/只, 右耳不涂作对照,1 h 后将小鼠颈部脱臼处死,剪下左右耳,用 9 mm 直径打孔 器分别在同一部位打下圆耳片,称重,左右耳重量之差作为肿胀度,并计算耳 肿抑制率。给药组与生理盐水组对照。结果见表 3。 抑制率(%)=对照组平均肿胀值-给药组平均肿胀值对照组平均肿胀值×100% 由表 3 可知,与生理盐水组相比,鲜、干药材水提物的大小剂量组和醇提 物大剂量组对小鼠二甲苯性耳廓肿胀均有明显的抑制作用,其中鲜品水提物大 剂量组作用最强。表 3 鱼腥草鲜、干药材醇提物和水提物对小鼠耳肿胀抗炎作 用观察(略) 2.4 镇咳作用考察〔9〕取小鼠 99 只,雌、雄各半,随机分为 9 组,每组 11 只。每日灌胃给药 1 次(0.2 ml/10 g 小鼠重量),连续 6 d,于末次给药 1 h 后,用浓氨水诱导法观察镇咳作用。即将小鼠放入玻璃钟罩内,打开通过橡 皮管与之相连的超声雾化器,将浓氨水均匀地喷入玻璃钟罩内,喷雾 10 s,立 即取出小鼠,以小鼠腹肌收缩并张大口为咳嗽动作指标,分别观察各组小鼠 2 min 中咳嗽次数。结果见表 4。 表 4 鱼腥草鲜、干药材醇提物和水提物对小鼠的镇咳作用观察(略) 由表 4 可知,与生理盐水组相比,鲜品、干品水提物大小剂量组和醇提物 高剂量组均对浓氨水诱导法引起的咳嗽具有较好的镇咳作用,其中鲜品水提物 大剂量组镇咳作用最优,而鲜干品醇提物的小剂量组作用不明显。 3 结论 鱼腥草鲜、干药材的水提取物的大小剂量组和醇提物的大剂量组对由二甲 苯致小鼠耳炎症、浓氨水诱导法引起的咳嗽均有较好的抗炎和止咳的作用,其 中鲜品水提物大剂量组抗炎、镇咳作用最优。分别采用稀释法和打孔法考察体 外抑菌作用,结果基本一致,鲜、干药材水提物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌 均具有抑制作用,而干品醇提物作用不明显。由此看出鱼腥草鲜品抗炎、止咳 和抑菌药理活性优于干品,而鱼腥草水提物药理活性优于醇提物,其作用的药 效物质基础有待进一步深入研究。 对鱼腥草的研究开发及临床应用药材,由于运输和贮存不便,大都用鱼腥 草干品。本课题首次对鲜、干鱼腥草进行药效学的比较研究,为鱼腥草鲜品的 开发研究和鱼腥草药效物质基础的研究提供了一定的理论依据。 【参考文献】 〔1〕国家药典委员会.中国药典〔S〕.北京:化学工业出版社,2005:155. 〔2〕曹 晖,王绍云.鱼腥草的化学成分及开发前景〔J〕.黔东南民族师 范高等专科学校学报,2005,12(23):20. 〔3〕张 倩,万晴姣.鱼腥草水溶性多糖的提取及鉴定〔J〕.食品科学, 2000,21(3):49. 〔4〕Meng J, Dong XP, Zhao ZZ, et al. Establishment of GC-MS fingerprint of fresh Houttuynia cordata〔J〕. Chem Pharm Bull, 2005, 53(11):1484. 〔5〕Meng J, Dong XP, Zhao ZZ, et al. Establishment of HPLC-DADMS fingerprint of fresh Houttuynia cordata〔J〕.Chem Pharm Bull, 2005, 53(12): 1604. 〔6〕熊大胜,席在星,邓应威.鱼腥草提取物抑菌作用研究〔J〕.常德师 范学院学报,2002,14(4):59. 〔7〕侯远生,张旭梅.鱼腥草注射液体外和小鼠体内抗菌作用研究〔J〕. 中国中药杂志,1990,15(4):29. 〔8〕徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学〔M〕.北京:人民卫生出 版社,2002:695. 〔9〕陈 英,韦 戈.百银镇咳颗粒止咳药理作用的研究〔J〕.广西医学, 2004,26(11):1613

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